К. А. Тимирязева фгбоу во ргау мсха имени К. А. Тимирязева



жүктеу 0.62 Mb.
бет4/8
Дата25.04.2016
өлшемі0.62 Mb.
1   2   3   4   5   6   7   8
: faculty
faculty -> Программа круглого стола «Математическое моделирование финансово-экономической деятельности в инновационной экономике»
faculty -> Вопросы к экзамену Для философской специальности фисмо 2-й курс III семестр Понятие религиозной философии, её типы. Вера и разум. Многообразие отношений между философией и религией
faculty -> Рабочая программа дисциплины (модуля) «Анатомия животных»

ЛАБОРАТОРНАЯ РАБОТА №2

ХРОМАТОГРАФИЯ

А. Хроматографическое разделение 2,4 - динитрофенилгидразонов альдегидов и кетонов на тонком незакреплённом слое оксида алюминия


Общая постановка задачи: освоить метод разделения и идентификации смеси 2,4-динитрофенилгидразонов (ДНФГ) альдегидов и кетонов.

Оборудование и реактивы:

  1. Станок для крепления стеклянной пластины

  2. Пластина для нанесения тонкого незакрепленного слоя сорбента

  3. Валик для выравнивания слоя сорбента

  4. Хроматографическая камера

  5. Растворы индивидуальных ДНФГ, отличающиеся подвижностью на сорбенте, раствор смеси ДНФГ

  6. Сорбент (оксид алюминия)

  7. Элюент (циклогексан – хлороформ – нитробензол 12 : 3 : 1)

Краткий конспект*:

Задание 1. Нанесение тонкого слоя сорбента на стеклянную пластину, нанесение пробы растворов ДНФГ и раствора смеси ДНФГ на стартовую линию сорбента и разделение смеси.

Не забудьте провести линию старта и проследить, чтобы линия старта с нанесёнными на неё веществами не погружалась в растворитель (элюент).

При выполнении хроматографического разделения необходимо внимательно следить за тем, чтобы капилляры, которыми набирают вещество, не попадали в склянки с другими веществами. Помните, что хроматография является очень чувствительным методом, и любая примесь будет сразу заметна на хроматограмме.



Задание 2. Зарисуйте полученную хроматограмму.

Задание 3.

Измерение положения пятен, соответствующих индивидуальным веществам, и границы подъёма (фронта) жидкости (элюента).

Результаты запишите в таблицу 3.

Таблица 3.



Путь, пройденный на адсорбенте ДНФГ и элюентом




Высота в мм

Высота фронта (h) элюента




ДНФГ1

Чистое вещество (h1)




В смеси (h2)




ДНФГ2

Чистое вещество (h3)




В смеси (h4)




Задание 4. Вычисление коэффициента распределения (Rf).

Коэффициент распределения рассчитывают по формуле:



Данные запишите в таблицу 4.

Таблица 4.

Значения коэффициентов распределения для всех индивидуальных веществ




Rf

ДНФГ1

Чистое вещество




В смеси




ДНФГ2

Чистое вещество




В смеси




Выводы:

Б. Разделение аминокислот с помощью распределительной хроматографии на бумаге


Общая постановка задачи: освоить метод разделения и идентификации смеси аминокислот.

Оборудование и реактивы:

  1. Цилиндр (хроматографическая камера)

  2. Бумага для хроматографии

  3. Растворы индивидуальных аминокислот, отличающиеся подвижностью на сорбенте, раствор смеси аминокислот

  4. Элюент (ацетон – вода 3:2)

  5. Проявитель (0,5 %-й раствор нингидрина в ацетоне)

Краткий конспект*:

Задание 1. Нанесение пробы растворов индивидуальных аминокислот и смеси аминокислот на бумагу. Хроматографирование.

Обратите внимание, что все пометки на бумаге для хроматографии делаются только простым карандашом! Не забудьте провести линию старта и проследить, чтобы линия старта с нанесёнными на неё веществами не погружалась в растворитель (элюент). После окончания разделения обязательно отметьте линию финиша, так как после того, как высохнет элюент, её будет трудно обнаружить.

При выполнении хроматографического разделения необходимо внимательно следить за тем, чтобы капилляры, которыми набирают вещество, не попадали в склянки с другими веществами. Помните, что хроматография является очень чувствительным методом, и любая примесь будет сразу заметна на хроматограмме.



Задание 2. Проявление пятен нингидрином и измерение положения пятен, соответствующих индивидуальным веществам.

Результаты запишите в таблицу 5.

Таблица 5.

Путь, пройденный аминокислотами и элюентом




Высота в мм

Высота фронта (h) элюента




аминокислота1

Чистое вещество (h1)




В смеси (h2)




аминокислота2

Чистое вещество (h3)




В смеси (h4)




Задание 3. Зарисуйте полученную хроматограмму.

Задание 4. Вычисление коэффициента распределения (Rf).

Коэффициент распределения рассчитывают по формуле:



Данные записывают в таблицу 6.

Таблица 6.

Значения коэффициента распределения для всех индивидуальных веществ




Rf

аминокислота1

Чистое вещество




В смеси




аминокислота2

Чистое вещество




В смеси




Выводы:



1   2   3   4   5   6   7   8


©netref.ru 2017
әкімшілігінің қараңыз

    Басты бет